Анотація

У цьому звіті міститься детальний технічний аналіз токсикологічного та генотоксикологічного профілю кислих олігосахаридів (PAOS), отриманих із- пектину, спеціальної форми модифікованого цитрусового пектину. Аналіз базується на комплексній оцінці безпеки Garthoff et al. вРегуляторна токсикологія та фармакологія (2010).¹Ключові сфери уваги включають фізико-хімічну характеристику матеріалу та профіль чистоти, критичне тлумачення різного

in vitroпротиin vivoдані генотоксичності та механістичне з’ясування видоспецифічної уротеліальної гіперплазії, що спостерігається на моделях гризунів. У сукупності дані встановлюють надійний профіль безпеки для цього нового пребіотичного інгредієнта.

Характеристика матеріалу та профіль чистоти

Препарат PAOS, оцінений у основних дослідженнях безпеки, був виготовлений із харчового -пектину за допомогою спеціального ферментативного методу. У процесі використовується полі(метоксил- -галактуронід)ліаза (EC 4.2.2.10) і полі(1,4-альфа-D-галактуронід)глікангідролаза (EC 3.2.1.15), обидві отримані з не-патогенних, нетоксикогенних штамівAspergillus niger.¹Отриманий продукт є сумішшю лінійних олігомерів галактуронової кислоти з ключовими характеристиками ідентичності, включаючи вміст галактуронової кислоти 62 г/100 г, молекулярну масу переважно нижче 3800 Да (94 г/100 г) і ступінь метилювання 50.¹

Для будь-якого матеріалу, призначеного для харчових або дослідницьких застосувань, профіль чистоти має першочергове значення. Партію PAOS, яка використовувалася в дослідженнях, ретельно проаналізували на наявність забруднювачів і залишків. Рівнімодифікований цитрусовий пектин важких металівта інші забруднювачі були визнані надзвичайно низькими, що відповідає принципам відповідного законодавства та належної сільськогосподарської практики.¹Короткий виклад цих висновків представлено нижче.

Дані взято з Garthoff et al., 2010¹

Низькі мікрограм{0}}на-кілограм ключових важких металів, таких як кадмій, свинець і ртуть, підкреслюють чисту природу сировини та виробничого процесу.

Критичний аналіз даних про генотоксичність

Оцінка генотоксичності PAOS дала результати, які підкреслюють важливість розгляду повної токсикологічної картини, зокрема зв’язку міжin vitroіin vivoданих. PAOS остаточно не виявилася мутагенною в аналізі бактеріальної зворотної мутації (тест Еймса) для п’яти штамів, з метаболічною активацією та без неї.¹

Однак,in vitroаналізи клітин ссавців дали більш складні результати. Аналіз мишачої лімфоми вважався «двозначним» через позитивні відповіді при високоцитотоксичних концентраціях, які не були відтворюваними та не мали чіткого зв’язку доза-відповідь.¹Подібним чином у тесті на хромосомну аберацію з використанням клітин СНО PAOS спочатку вважався кластогенним за умов постійного лікування. Подальше-дослідження показало, що цей ефект значною мірою залежав від цитотоксичності та використовуваного розчинника (ДМСО). Коли PAOS суспендували в культуральному середовищі-більш фізіологічно релевантний носій-значне збільшення аберантних клітин спостерігалося лише при найвищій рекомендованій дозі (

5000 мкг/мл) і був пов’язаний з високою цитотоксичністю (МІ 34%), що змусило авторів зробити висновок, що це не було біологічно значущим.¹Ці висновки свідчать про позитив

in vitroРезультати, ймовірно, були артефактами, спричиненими цитотоксичністю, відомим фактором, що спотворює такі аналізи.

Остаточний профіль безпеки In Vivo

Найбільш фізіологічно релевантні дані для оцінки генотоксичного ризику походять зin vivoнавчання. Мікронуклеарний тест був інтегрований у 13-тижневе дослідження субхронічної пероральної токсичності на щурах, дизайн, який забезпечує тривалий вплив досліджуваної речовини та її метаболітів. Дослідження, яке також включало anвнутрішньоутробнофазі експозиції продемонстрували, що PAOS не впливав на здоров’я батьків, фертильність, відтворення чи характеристики дитинчат.¹Найважливішим є аналіз клітин кісткового мозку стегнової кістки щурів у групі високих-доз (10% PAOS у раціоні, споживання, що перевищує

7 г/кг маси тіла/день) не виявили збільшення середньої кількості мікроядерних поліхроматичних еритроцитів порівняно з контролем.¹Крім того, співвідношення поліхроматичних і нормохроматичних еритроцитів не змінилося, що вказує на відсутність цитотоксичності для кісткового мозку.¹Цей негатив

in vivoРезультат забезпечує остаточні докази того, що PAOS не володіє генотоксичною активністю в фізіологічних умовах.

Механістичне з’ясування видового-специфічного артефакту

Суб{0}}дослідження виявило дифузну уротеліальну гіперплазію у щурів, які отримували 10% PAOS. Замість того, щоб бути індикатором прямої токсичності олігосахаридів, це було припущено як вторинний ефект. Додаткове механічне дослідження було розроблено для перевірки гіпотези про те, що гіперплазія була спричинена одночасним підвищенням концентрації натрію в сечі та рН, стан, який, як відомо, викликає цей специфічний ефект у щурів.¹Дослідження включало групу, якій годували 10% PAOS плюс підкислювач

NH4​Cl. Результати були однозначними: низький pH сечі в групі NH4​Clповністю запобігає розвитку гіперплазії уротелію.¹Це підтвердило механізм і продемонструвало, що ефект не притаманний PAOS, а є видо-специфічним артефактом фізіології сечовипускання, який не вважається актуальним для людей.¹

Суворість, продемонстрована в цих дослідженнях, відображає наукову відданість провідних виробників, таких як Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. Як національне високо-технологічне підприємство, яке співпрацює з провідними-університетами, компанія надає пріоритет не лише виробництву, а й глибокому науковому розумінню своєї продукції. Використання вдосконаленого ферментативного гідролізу на 100 000-класі GMP-сертифікованого підприємства забезпечує виробництво високочистогомодифікований цитрусовий пектинпідходить для вимогливих досліджень і розробок. Щоб отримати технічні характеристики, сертифікат аналізу або обговорити співпрацю в дослідженнях, будь ласка, зв’яжіться з wilson@zjgykp.com.

Висновок: добре-характеризований інгредієнт для досліджень і розробок

Модифікований цитрусовий пектин (PAOS) ​​є матеріалом з ретельно вивченим і сприятливим профілем безпеки. Повні дані показують, що він не-мутагеннийin vivoта потенційні занепокоєння відin vitroаналізи були раціоналізовані як артефакти цитотоксичності. Спостереження гіперплазії уротелію у щурів було механістично пояснено як вид-специфічну реакцію на зміну хімічного складу сечі, і це не стосується людей. Висока чистота матеріалу та надзвичайно низький рівень забруднень, у тому числі важких металів, роблять його добре-охарактеризованим і надійним інгредієнтом для подальших досліджень і розробок у галузі харчування та фармакології.

Цитовані твори

безпека пектину 1.pdf